Bu tamponlar, nötr pH'taki biyolojik uygulamalarda kullanılabilir.
Fosforik asit için üç pKa değeri (CRC El Kitabı Kimya ve Fizik'ten), 2.16, 7.21 ve 12.32'dir. Monosodyum fosfat ve onun konjugat bazı, disodyum fosfat genellikle burada gösterildiği gibi, biyolojik uygulamalar için 7 civarında pH değerlerini tamponlar oluşturmak için kullanılır.
Bu tamponu yapmak TAE ve TBE tamponlarını yapmaktan biraz daha zor. Ancak son derece zor değil. Sadece ortalama. Bu tamponu kırmak yaklaşık 10 dakika sürmelidir. İşte nasıl.
1. Tampon Özelliklerine Karar Verme
Bir arabellek yapmadan önce, hangi molaritenin olmasını istediğinizi, hangi hacmin yapılacağını ve istenilen pH değerini bilmeniz gerekir. Tamponların çoğu, 0.1 M ila 10 M arasındaki konsantrasyonlarda en iyi şekilde çalışır. PH, asit / konjugat baz pKa'nın 1 pH birimi içinde olmalıdır. Basitlik için, bu örnek hesaplama 1 litre tampon için olacaktır.
2. Asitin Baza Oranını Belirleme
İstenen pH'ı tamponlamak için asitin baz oranının ne olduğunu belirlemek için Henderson-Hasselbalch denklemini (aşağıda) kullanın. İstediğiniz pH değerine en yakın pKa değerini kullanın ve oran, o pKa'ya karşılık gelen asit-baz konjugat çiftine değinecektir.
HH Denklemi: pH = pKa + log ([Temel] / [Asit])
PH 6.9'luk bir tampon için, [Baz] / [Asit] = 0.4898
[Asit] için Yedek ve [Temel] için Çöz
Tamponun istenen molaritesi [Asit] + [Baz] toplamıdır.
1 M tampon için, [Base] + [Acid] = 1 ve [Base] = 1 - [Acid]
Bunu oran denklemine koyarsanız, 2. adımdan şunu elde edersiniz:
[Asit] = 0.6712 mol / L
[Asit] için çözün
Denklemi kullanarak: [Base] = 1 - [Acid], şunları hesaplayabilirsiniz:
[Taban] = 0.3288 mol / L
3. Asit ve Konjugat Tabanı Karıştırın
Tamponunuz için asit-baz oranını hesaplamak için Henderson-Hasselbalch denklemini kullandıktan sonra, doğru miktarlarda monosodyum fosfat ve disodyum fosfat kullanarak hemen 1 litrelik solüsyon hazırlayın.
4. pH'ı kontrol edin
Tampon için doğru pH değerine ulaşıldığını doğrulamak için bir pH probu kullanın. Fosforik asit veya sodyum hidroksit (NaOH) kullanarak gerektiği kadar hafifçe ayarlayın.
5. Ses Seviyesini Düzeltin
İstenen pH'ye ulaşıldığında, tampon hacmini 1 litreye getirin. Ardından tamponu istediğiniz gibi seyreltin. Bu aynı tampon 0.5 M, 0.1 M, 0.05 M aralığındaki tamponlar veya aralarında bir şey oluşturmak için seyreltilebilir.
6. Tampon için ipuçları
PKa'nın kesin bir değere kolayca ölçülemediğini unutmayın. Literatürde farklı kaynaklardan biraz farklı değerler bulunabilir.
7. Ne İhtiyacınız Var
Tampon yapmak için, kalan malzemeler ekipman iken, üç maddeye ihtiyacınız olacak. Maddeler, pH'ı ayarlamak için monosodyum fosfat, disodyum fosfat ve fosforik asit veya sodyum hidroksittir.
Ayrıca bir pH metre ve prob ve uygun bir laboratuvar yazılımına ihtiyacınız olacaktır. Bu volumetrik bir şişe, dereceli silindirler, kadehler ve karıştırma çubukları içerir.
Son olarak, bir karıştırıcı ocak gerekir.